重組膠原蛋白是采用基因工程技術(shù)在合適的宿主中表達(dá)并翻譯的蛋白或類似膠原蛋白的多肽，相對(duì)于天然提取的膠原蛋白，具有批次間穩(wěn)定、組分可控、生物安全性高和可編輯修飾等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于美容護(hù)膚，皮膚、眼科修復(fù)與骨修復(fù)等醫(yī)學(xué)保健領(lǐng)域。賽分科技復(fù)合離子交換填料Agarosix MC75/45-MMC純化性能優(yōu)越穩(wěn)定，通用性強(qiáng)，已成功適用于I型、III型、Ⅴ型、XVII型等多種亞型的重組人源化膠原蛋白純化，是重組膠原蛋白純化的“明星之選”。

技術(shù)參數(shù)

填料特點(diǎn)

　　1 純化性能優(yōu)越穩(wěn)定

　　分辨率高，耐鹽性好，去色素效果好，純化效率高，多個(gè)案例一步純化后SEC純度均在90%以上，有效節(jié)約成本

　　2 通用性強(qiáng)

　　適用于Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型、XⅤⅡ型等多種亞型的重組人源化膠原蛋白純化

應(yīng)用案例一

　　酵母表達(dá)的某Ⅲ型重組人源化膠原蛋白樣品，關(guān)鍵雜質(zhì)為降解蛋白、非目的蛋白等，上樣載量為20 mg/mL，經(jīng)一步Agarosix MC75-MMC純化，純度由71%提升至99.2%，一步收率可達(dá)79.2%。

　　對(duì)降解片段有非常優(yōu)秀的去除效果

　　洗脫體積小，僅有2 CV

圖1. Agarosix MC75-MMC純化某Ⅲ型重組人源化膠原蛋白樣品圖譜

應(yīng)用案例二

　　大腸桿菌表達(dá)的某重組膠原蛋白樣品，分別用Agarosix MC45-MMC和Ni親和填料進(jìn)行純化，Agarosix MC45-MMC相較于Ni親和填料，電泳結(jié)果中降解片段去除效果更好；可一步達(dá)到純度要求，無(wú)需銜接精純步驟，色素去除效果更佳，成本更可控。

　　圖2. Agarosix MC45-MMC與Ni親和填料純化純化某重組膠原蛋白樣品對(duì)比

重組膠原蛋白純化工藝

　　重組膠原蛋白的主要表達(dá)體系為大腸桿菌和酵母，其典型雜質(zhì)包括宿主蛋白、降解片段、宿主核酸，以及大腸桿菌表達(dá)體系中需重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)毒素?；趯?shí)際應(yīng)用案例，賽分科技設(shè)計(jì)了以下純化工藝方案（如圖3）：對(duì)于帶His標(biāo)簽的大腸桿菌表達(dá)產(chǎn)物，首選Ni親和層析進(jìn)行捕獲；不含標(biāo)簽的產(chǎn)物通常選用離子交換層析或復(fù)合層析等富集目標(biāo)蛋白，若樣品中存在較多降解片段，可增加疏水層析精純步驟；部分樣品選用一步疏水層析在鹽濃度較低的情況下也能保持高分辨率和高載量；最終采用陰離子交換層析有效去除內(nèi)毒素，確保終產(chǎn)物純度。

圖3. 重組膠原蛋白純化工藝示意圖

推薦填料及訂購(gòu)信息

　　注：包裝規(guī)格為1 L，5 L， 10 L， 50 L，預(yù)裝柱規(guī)格為1 mL， 4.2 mL， 5 mL

互動(dòng)有禮

　　如需Agarosix MC75/45-MMC及以上填料，請(qǐng)掃描下圖二維碼，填寫問(wèn)卷信息申請(qǐng)?jiān)囉醚b測(cè)試，并可參與問(wèn)卷抽獎(jiǎng)活動(dòng)。

　　關(guān)于賽分科技（股票代碼：688758.SH）

　　賽分科技致力于開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)用于生物大分子等藥物分離純化的液相色譜材料，歷經(jīng)二十余年在色譜層析領(lǐng)域的深耕，已發(fā)展成為集研發(fā)、生產(chǎn)和全球銷售為一體的實(shí)業(yè)型企業(yè)，形成中美兩地雙研發(fā)、雙生產(chǎn)模式，服務(wù)全球客戶超5000家。公司主要產(chǎn)品為色譜層析介質(zhì)、液相色譜柱，為全球生物制藥企業(yè)提供從藥品研發(fā)、臨床前（Pre-IND）到臨床Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期、生產(chǎn)以及質(zhì)控全周期全流程分析色譜和工業(yè)純化解決方案。